蒙娜·丽萨是意大利佛罗伦萨的银行家佛朗切斯科·捷列·佐贡多的第三个妻子，虽然并不是一位绝世佳人，但长得庄重大方，尤其在微笑的时候更为迷人。
　　达·芬奇接到为蒙娜·丽萨画像的委托后，便对她进行了仔细的观察，最后决定选取她微笑时的容貌来作画。在作画过程中，为了不使蒙娜·丽萨厌倦，他不断地与她谈话，讲故事给她听，又请来乐师为她演奏，请说笑的人在一旁为她表演，经过三年时间断断续续的描绘，终于将她那迷人的微笑永恒地留在了白杨木板上。
　　画中的蒙娜·丽萨为胸像，整个外形呈金字塔型，显得端庄稳重。她长发披肩，身着长袖衣裙，双手安稳地互相搭在一起，脸部半侧，双目侧视，嘴角稍稍上翘，露出一丝淡淡的神秘的微笑，这是一种温柔、从容、充满自信的笑容，亦带着几分讥讽、嘲弄的意味。达·芬奇通过对这一庄重的姿态的描绘，特别是通过对她这神秘的微笑的刻画，含蓄地揭示了她蕴藏在内心的美。画家又通过对背景上的远山、蜿蜒的溪水等安排，创造出一个宁静幽美、富于诗意的境界来衬托人物，似乎将蒙娜·丽萨拉向了奥林匹亚山，成为一位人间的仙女，整幅画面沉浸在深棕色的色调中，使得呈肉黄色的脸部、颈胸部和双手显得格外明亮动人。